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이 름

신주미	2004-01-20 09:11:08, Hit : 7500

제 목

Anti-HA hybridoma cell culture

[ HA ]
Influenza virus의 two glycoprotein 중 하나인 hemagglutinin (sulface protein의 epitope)

[ 12CA5 cell line (HC: 50 kDa, LC: 25 kDa) ]
Culture media
50 ml      FBS (10%)
5 ml      100X Sodium pyruvate (100 mM solution)
5 ml      100X Non-essential Amino Acids (4℃ 보관)
5 ml      1M Hepes buffer (4℃ 보관)
5 ml      100X MEM Vitamin (-20℃ 보관)
5 ml      100X L-Glutamine (-20℃ 보관)]
              (RPMI 안에 포함되어 있는 경우, 생략 가능)
total       500 ml RPMI

1. suspension cell line culture- cell 이 바닥에 붙더라도 trypsine EDTA사용하지 않고 pipet 으로 suspension 하면서 떨어뜨린다.

2. cell 이 flask 에 빡빡하게 자랐을 때 50 ml cornical tube 에 모아 centrifuge 후 cell pellet 을 제외한 culture medium 을 filteration (pore size=0.5 이하) 한 후 western 1차 antibody로 이용.

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